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IncuCyte™ Applications : Transfection Efficiency


GFP / RFP의 construct를 이용하여 gene transfection 효율과 시간 경과를 모니터링하고 정량화합니다.


Key Features

Reagent 최적화

GFP / RFP construct를 사용하여 서로 다른 조건에 따른 시간에 따른 발현의 효율을 비교 할 수 있음.

다양한 tissue culture vessel 사용

T flask, micro plate, dish사용 가능. 저배율에서 고배율 사용가능(4x, 10x, 20x). vessel의 여러 영역을 imaging하여 공간적인 변화를 강조하고 세포 분포를 최적화 가능.

Cell Confluence와 Cell Health의 관찰

Transfection 전, 정확하게 세포 transfection의 기술을 표준화하기 위해 cell confluence를 평가함. Transfection 후에 label-free phase segmentation을 사용하여 cell health와 시약의 효과를 관찰함.

Expression Intensity의 관찰

히스토그램을 사용해 transfected cell의 RFP / GFP 강도의 분포를 관찰.


Example Data

좌측 상단: NucLight green lenti- virus로 형질 도입 된 A549 human lung carcinoma cells GPF의 발현 시간 경과. 가로축 : time (h), 세로축 : (MM2 당) fluorescent object 수. 우측 상단: NucLight Green lenti-virus로 transfection된 A549 human lung carcinoma cell의 HD phase contrast image와 green fluorescence image의 혼합. 핵에 제한적인 균일한 GFP의 발현이 확인됨. NucLight green을 사용한 transduction은 titration이 가능하고 효율은 polybrene을 통해 향상 될 수 있음. (좌측 하단: A549 cells, 우측 하단: HUVECs)

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