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IncuCyte™ Applications : Other interesting applications


우리는 kinetic적인 live cell imaging의 가치, 폭, 다양성을 보여주기 위해 IncuCyte 사용자로부터 얻어진 몇 가지의 흥미로운 application을 소개합니다. 이러한 내용들이 새로운 사고와 창의력을 발휘하는데 도움이 되길 희망합니다.


Viral Titers and Antiviral Screening

IncuCyte ZOOM® enables fast, efficient and accurate measurement of infectious viral titres. A highly flexible fixed cell analysis protocol suitable for antiviral screening.

A novel method for the measurement of hepatitis C virus infectious titres using the IncuCyte ZOOM and its application to antiviral screening.

Stewart H, Bartlett C, Ross-Thriepland D, Shaw J, Griffin S, Harris M. J Virol Methods. 2015 Jun 15;218:59-65


Viral Replication

IncuCyte™ was used to quantify replication of the Foot-and-mouth disease virus replicon system within mammalian cells. A rapid and facile alternative to RT-qPCR and CAT assays.

FMDV replicons encoding green fluorescent protein are replication competent

Tulloch F, Pathania U, Luke GA, Nicholson J, Stonehouse NJ, Rowlands DJ, Jackson T, Tuthill T, Haas J, Lamond AI, Ryan MD. Journal of Virological Methods, 209:35-40, 2014

Inhibition of the FMDV sub-genomic replicon by RNA aptamers Forrest,

Forrest , Lear , Herod MR, Ryan M, Rowlands DJ, Stonehouse NJ. The Journal of General Virology, 2014 Dec;95(Pt 12):2649-57


Immune Cell Killing

Cancer cell 특이 antigens은 종양 면역 치료를 위한 유망대상입니다.

Bi-specific TCR-anti CD3는 NY-ESO-1 및 LAGE-1 양성 종양 표적 T cell 전용.

McCormack E, Adams KJ, Hassan NJ, Kotian A, Lissin NM, Sami M, et al. Cancer Immunol Immunother, 62(4):773–85, 2013


Cell Tracking

IncuCyte time lapse imaging은 집단 내의 개별 세포의 움직임을 추적하는 데 사용됩니다. imageJ 때문에 IncuCyte 이미지 분석은 세포의 속도뿐만 아니라, 덮혀진 곳과 vectoral 거리를 측정 가능합니다.

N-cadherin의 발현 수준은 integrin-mediated의 속도와 glial 세포의 이동 방향에 강하게 영향을 변조.

Camand, E., Peglion, F., Osmani, N., Sanson, M. & Etienne-Manneville, S. J. Cell Sci. 125, 844–57 (2012).

Defining Akt actions in muscle differentiation.

Gardner, S., Anguiano, M. & Rotwein, P. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 303, C1292–300 (2012).


Cell Clustering Dynamics

IncuCyte는 size와 shape metrics 에 따라 T-cell clustering을 kinetic적으로 정량합니다.

T cell 활성화의 두드러진 특징은 ICAM-1과 LFA-1 integrin과의 상호 작용을 통해 T 세포의 클러스터합니다.

Zumwalde, N. a, Domae, E., Mescher, M. F. & Shimizu, Y. J. Immunol. 191, 3681–93 (2013).


Cell Fate

IncuCyte는 근원 세포의 proliferation과 fate의 현저한 변동을 공개합니다.

Live cell imaging reveals marked variability in myoblast proliferation and fate.

Gross, S. M. & Rotwein, P. Skelet. Muscle 3, 10 (2013).


Spheroid Invasion

IncuCyte 고화질의 위상차 영상은 3D biomatrices를 통해 spheroid invasion 동적 시각화 및 분석 (ImageJ의)를 사용합니다.


Senescence

kinetic적인 cell senescence measurement는 long term cell cultures 배양의 핵 영역 및 세포 수를 정량화하기 위해 IncuCyte를 이용하였습니다.

cell senescence의 대체 측정은 proliferation을 평가하고, 약물 유도 senescence & washout 을 감시하기 위해 confluence metric을 사용하여 만들어집니다.


Intracellular Vesicle Dynamics

IncuCyte 고화질의 위상차 이미지의 사용은 intracellular vesicle formation 의 dynamic을 모니터링합니다.


Hypoxia

fluorescence기반의 HIF-1 분석. IncuCyte control of an artificial (HRP)의 hypoxia-responsive promoter 제어하에 EGFP를 발현하는 reporter cell line의 GFP의 accumulation 을 발견합니다.

IncuCyte는 hypoxia reporter cell line 이용하여 3D spheroid의 상태의 변화를 모니터링합니다.

Loss of cancer drug activity in colon cancer HCT-116 cells during spheroid formation in a new 3-D spheroid cell culture system.

Karlsson, H., Fryknäs, M., Larsson, R. & Nygren, P. Exp. Cell Res. 318, 1577–85 (2012).


Reactive Oxygen Species (ROS)

세포 내 ROS 생산은 oxidative stress의 지표와 DCFH-DA를 사용하여 실시간으로 모니터링합니다.

Identification of anti-allergic effect of Clonorchis sinensis-derived protein venom allergen-like proteins (CsVAL).

Jeong, Y.-I. et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. (2014). doi:10.1016/j.bbrc.2014.01.189


Colony Formation

IncuCyte의 사용은 colony의 single cell origin을 확인합니다.

Clonogenicity: holoclones and meroclones contain stem cells.

Beaver, C. M., Ahmed, A. & Masters, J. R. PLoS One 9, e89834 (2014).


Anchorage-Independent Growth

IncuCyte는 poly HEMA 코팅 된 well에서 3D anchorage-independent cell growth에 사용됩니다.


Chromosomal Dynamics

IncuCyte는 chromosomal dynamics을 시각화하고, H2BGFP가 HeLa 세포와 transfected 를 측정하는 데 사용됩니다.


Megakaryocyte Pro-platelet Production

IncuCyte는 자동으로 다른 well coatings 의 존재하에 proplatelet formation 및 megakaryocyte adherence 모니터하는 데 사용됩니다.


Intracellular F-actin Dynamics

IncuCyte mouse bone marrow-derived osteoclast cultures 내 F-actin dynamics을 모니터하는 데 사용됩니다.