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IncuCyte™ Applications : Immune Cell Clustering & Proliferation


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What is immune cell clustering and proliferation?

면역반응 중에 면역체계에 의해 활성화된 T lymphocyte와 같은 세포는 감염이나 질병에 대항하기 위해 빠른 확장을 필요로 합니다. 또한 많은 상호작용이 활성화 된 면역 세포간에 일어나게 됩니다. (e.g., 항원이 존재하는 세포와 T cell과의 상호작용, T cell간의 상호작용). 이러한 세포의 수와 세포간의 상호작용의 역동적인 변화들은 면역반응의 조절과 확장에 필수적인 요소 입니다. 면역세포의 활성화/Proliferation/조절을 이해하는 것은 새로운 효과적인 항암 면역치료법을 개발하는데 핵심적인 요소 입니다.


IncuCyte™ Immune cell clustering & proliferation assay 소개

면역세포 상호작용과 Proliferation을 실시간 시각화와 정량. 면역세포의 활성화(Proliferation) /조절/분화(Clustering) 원리를 incubator 내부에서 별도의 label이나 이동 없이 연구.


Featured IncuCyte™ publications

Zumwalde NA, Domae E, Mescher MF, Shimizu Y. ICAM-1-dependent homotypic aggregates regulate CD8 T cell effector function and differentiation during T cell activation. J Immunol, 191(7):3681–93, 2013

Revealing the mechanisms of activated T cell aggregation using IncuCyte ZOOM® real time imagnig and cell cluster analysis.

"T cell clusters regulate the tuning of CD8+ T cell function and terminal differentiation. These studies contribute to our knowledge of the necessity of T cell interactions and crosstalk during priming and potentially, via cluster manipulation, we hope to augment vaccine efficacy and anti-tumor immunotherapeutics".

Zumwalde, N. A. The Role of ICAM-1 Mediated T cell:T cell Interactions on CD8+ T cell Effector Function and Differentiation. A Thesis Submitt. Requir. University of Minnesota. Degree Dr. Philos. (2013)


IncuCyte™ Immune cell clustering and proliferation assay의 Key advantages

실시간 시각화와 자동화된 분석.

Full time-course에 대한 관찰을 incubator 내부에서 수행.

Label free, kinetic적인 측정.

Wash가 필요없고, cell을 이동하지 않고, antibody labeling이 필요 없음.

실시간 시각화와 자동화된 분석

Proliferation과 cell-cell clustering 과정을 incubator에서 culture vessel을 이동시키지 않고 실시간으로 관찰.

자동화된 이미지 촬영과 분석 –IncuCyte™ image analysis software를 사용해 Label-free로 cluster를 counting.

이미지와 동영상을 사용해 phenotype의 관찰.

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T cell aggregation의 label free 관찰. Anti-CD3 antibody와 IL-2에 의해 활성화된 PBMC로 인해 유도된 T cell aggregation(clustering). 사용하기 편리한 IncuCyte™ software를 사용해 시간에 따른 cell clustering을 정확히 정량(blue mask).

사용자의 cell incubator 내에서 full time-course 관찰

treatment에 따른 immune cell clustering과 proliferation kinetics에 대한 영향을 보여줌.

Culture 과정은 실험 기간 동안 incubator 내부에서 방해 받지 않고 진행됨.

Image

Clustering의 실시간 측정. 자동화된 time course analysis를 통해 나타난 treatment 효과. Increasing the concentration of in the presence of IL-2 (10 ug/ml)이 존재하는 상황에서 anti-CD3 a ntibody를 0.01에서 10 ug/ml처리 했을 때 농도에 의해 증가하는 T cell clustering.

No wash, no cell lifting, no antibody labelling

Proliferation과 clustering 별도의 label 없이 측정.

설정 후 모든 과정의 자동화 – 완전히 자동화된 이미지 촬영과 분석.

flow cytometry와 end point biochemical 측정과 호환가능 – 간단히 cell과 supernatant를 assay가 끝난 시점에 harvest 가능.

Image

PBMC proliferation의 실시간, label free 관찰. 144시간동안 IncuCyte ZOOM®을 사용해 anti-CD3 antibody와 IL-2에 의해 활성화된 PBMC proliferation(yellow mask)을 자동적으로 정량한 결과. PBMC proliferation의 조건 별 full time course 결과.