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IncuCyte™ Applications : 3D-Spheroids


IncuCyte ZOOM®을 사용하여 비 부착성 Spheroid의 형성과 성장 및 수축을 확인할 수 있습니다.


Key Features

96- & 384-well format으로 사용 가능한 손쉬운 실험법

spheroid growth 와 shrinkage를 측정 할 수 있는 자동화된 96-well방식의 kinetic적인 이미지를 기반으로 한 분석방법. 간단하며, 비침습적이고, 저렴한 소모품을 사용하며 hanging drop & transfer가 불필요.

Spheroid size를 kinetic적으로 측정

Fluorescence area나 fluoresence intensity metric을 사용하여, 시간에 따른 spheroid growth와 shrinkage를 관찰하고 측정 할 수 있음.

자동화된 이미지 촬영과 처리

fully-integrated software algorithm을 사용해 이미지를 얻고 분석 가능. kinetic plot을 micro-plate view 방식으로 시각화 할 수 있음. EC50/IC50 값을 계산하거나 보고서 작성을 위해 손쉽게 Data Export가 가능함.

cell health 측정과도 연계하여 사용가능

상층액을 얻어내어 ATP, lactate등의 측정에 사용 가능.

2D와 3D Biology를 나란히 측정 가능

IncuCyte를 사용하여 동시에 동일한 cell과 test agent에 대한 연구를 2D와 3D로 수행 할 수 있음.


Example Data

Nuclear restricted RFP(A549 NucLight Red)를 발현하는 A549 human adenocarcinoma cell의 성장과 수축. 안정적으로 발현되는 spheroid 상에 vehicle control이나 Staurosporine(SSP, 1 micromolar) at t=0(cell seeding후 3일후)를 처리함. Red 이미지는 IncuCyte를 사용해 얻은 HD phase 이미지와 RFP 이미지를 겹침. control spheroid에서는 size의 증가와 형광의 강도가 강해지는 것이 확인되나, SSP가 처리된 spheroid는 수축과 형광의 감소가 확임됨. Blue 이미지는 IncuCyte ZOOM® analysis mask를 보여줌.

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좌측 상단: Size histogram: 192개의(2개의 96 well plate) A549 NucLight Red spheroid의 seeding후 3일 시점의 Area (microns2) 우측 상단: Microplate view: test agent가 처리된 A549 NucLight Red spheroid의 10일간의 Proliferation time-course. 가로축 : time (h), 세로축: fluorescence confluence(%). 좌측 하단: A549 NucLight Red spheroids에 staurosporin 처리 후의 Proliferation time-course. 가로축: time(h), 세로축: spheroid fluorescence area(microns2). 우측 하단: Staurosporine의 농도에 따른 반응. 좌측 하단: Staurosporine time-course data의 Area Under Curve(AUC) 분석. 가로축: Staurosporine(M)의 농도, 세로축: spheroid fluorescence area(AUC).

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